home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ Cancer - Principles & Practice of Oncology / Oncology.iso / PPO / CHAP1 / F7.CAP < prev    next >
Text File  |  1999-06-07  |  1KB  |  20 lines
  1. FIGURE 1-7. An example of immunoprecipitation. SK-LMS cells expressing
  2. the tyrosine  kinase growth  factor receptor c-met  were analyzed  for
  3. their  Met autophosphorylation  response to  the  ligand human  growth
  4. factor (HGF)/SF or to the naturally occurring variant NK2. Cells where
  5. treated with  either 200 units  per milliliter  of HGF  as a  positive
  6. control (lane  6), were  not treated (lane  5), or  were treated  with
  7. increasing amounts  of NK2  (lanes 1-4) for  10 min.  After treatment,
  8. lysates  were   prepared  and  immunoprecipitated   with  an  anti-met
  9. antibody. Immunoprecipitated proteins were  resolved by SDS-PAGE under
  10. reducing   conditions  and  analyzed  by  Western  blotting  using  an
  11. anti-phosphotyrosine    antibody   which    detects   only    proteins
  12. phosphorylated on tyrosine (top panel). To show the total abundance of
  13. both phosphorylated and  nonphosphorylated Met, the blot  was stripped
  14. and reprobed with an anti-Met  antibody (bottom panel). Comparison  of
  15. the  two  panels   indicates  that  both   ligands  can  mediate   Met
  16. autophosphorylation,  although  NK2  does  so  less  efficiently  than
  17. HGF/SF.  This  result   is  surprising  since  NK2   does  not  induce
  18. invasiveness of SK-LMS cells although HGF/SF does. (Lee J-H, Klein HG.
  19. Cellular gene therapy. Transfus Med II 1995;9:91)
  20.