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Text File  |  1996-01-30  |  2KB  |  34 lines
  1.        Document 0491
  2.  DOCN  M9610491
  3.  TI    Tools for the production and purification of full-length, N- or
  4.        C-terminal 32P-labeled protein, applied to HIV-1 Gag and Rev.
  5.  DT    9601
  6.  AU    Jensen TH; Jensen A; Kjems J; Department of Molecular Biology,
  7.        University of Aarhus, Denmark.
  8.  SO    Gene. 1995 Sep 11;162(2):235-7. Unique Identifier : AIDSLINE
  9.        MED/96032349
  10.  AB    We have constructed two new vectors for the production of foreign
  11.        proteins in Escherichia coli. The vectors, pGEX-GTH and pET-HTG, produce
  12.        protein fused to glutathione S-transferase (GST) at the N- and
  13.        C-termini, respectively, allowing one-step purification on
  14.        glutathione-Sepharose. Furthermore, they carry the recognition sequence
  15.        (RRASV) for the catalytic subunit of cAMP-dependent heart muscle kinase
  16.        (HMK) at the terminus distal to the GST tag, enabling specific 32P
  17.        labeling in vitro. By positioning the GST and HMK sequences at opposite
  18.        ends of the introduced gene, only full-length fusion protein becomes
  19.        radiolabeled after purification. Avoiding the labeling of shorter fusion
  20.        protein species, often observed in bacterial expression of foreign
  21.        genes, is particularly important for a number of different purposes,
  22.        including protein mobility shift analysis and protein footprinting
  23.        technology.
  24.  DE    Amino Acid Sequence  Base Sequence  Gene Products,
  25.        gag/GENETICS/*ISOLATION & PURIF  Gene Products, rev/CHEMISTRY/*ISOLATION
  26.        & PURIF  *Genetic Vectors  Glutathione Transferases/CHEMISTRY
  27.        HIV-1/*CHEMISTRY  Molecular Sequence Data  Phosphorus Radioisotopes
  28.        Recombinant Proteins/*ISOLATION & PURIF  Support, Non-U.S. Gov't
  29.        JOURNAL ARTICLE
  30.  
  31.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  32.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  33.  
  34.