home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ Collection of Education / collectionofeducationcarat1997.iso / HEALTH / MED9602.ZIP / M9620391.TXT < prev    next >
Encoding:
Text File  |  1996-02-27  |  4.2 KB  |  64 lines
  1.        Document 0391
  2.  DOCN  M9620391
  3.  TI    Mutagenic analysis of human immunodeficiency virus type 1 Vpr: role of a
  4.        predicted N-terminal alpha-helical structure in Vpr nuclear localization
  5.        and virion incorporation.
  6.  DT    9602
  7.  AU    Yao XJ; Subbramanian RA; Rougeau N; Boisvert F; Bergeron D; Cohen EA;
  8.        Departement de Microbiologie et Immunologie, Faculte de; Medecine,
  9.        Universite de Montreal, Quebec, Canada.
  10.  SO    J Virol. 1995 Nov;69(11):7032-44. Unique Identifier : AIDSLINE
  11.        MED/96013806
  12.  AB    The Vpr gene product of human immunodeficiency virus type 1 is a
  13.        virion-associated protein that is important for efficient viral
  14.        replication in nondividing cells such as macrophages. At the cellular
  15.        level, Vpr is primarily localized in the nucleus when expressed in the
  16.        absence of other viral proteins. Incorporation of Vpr into viral
  17.        particles requires a determinant within the p6 domain of the Gag
  18.        precursor polyprotein Pr55gag. In the present study, we have used
  19.        site-directed mutagenesis to identify a domain(s) of Vpr involved in
  20.        virion incorporation and nuclear localization. Truncations of the
  21.        carboxyl (C)-terminal domain, rich in basic residues, resulted in a less
  22.        stable Vpr protein and in the impairment of both virion incorporation
  23.        and nuclear localization. However, introduction of individual
  24.        substitution mutations in this region did not impair Vpr nuclear
  25.        localization and virion incorporation, suggesting that this region is
  26.        necessary for the stability and/or optimal protein conformation relevant
  27.        to these Vpr functions. In contrast, the substitution mutations within
  28.        the amino (N)-terminal region of Vpr that is predicted to adopt an
  29.        alpha-helical structure (extending from amino acids 16 to 34) impaired
  30.        both virion incorporation and nuclear localization, suggesting that this
  31.        structure may play a pivotal role in modulating both of these biological
  32.        properties. These results are in agreement with a recent study showing
  33.        that the introduction of proline residues in this predicted
  34.        alpha-helical region abolished Vpr virion incorporation, presumably by
  35.        disrupting this secondary structure (S. Mahalingam, S. A. Khan, R.
  36.        Murali, M. A. Jabbar, C. E. Monken, R. G. Collman, and A. Srinivasan,
  37.        Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:3794-3798, 1995). Interestingly, our
  38.        results show that two Vpr mutants harboring single amino acid
  39.        substitutions (L to F at position 23 [L23F] and A30F) on the hydrophobic
  40.        face of the predicted helix coded for relatively stable proteins that
  41.        retained their ability to translocate to the nucleus but exhibited
  42.        dramatic reduction in Vpr incorporation, suggesting that this
  43.        hydrophobic face might mediate protein-protein interactions required for
  44.        Vpr virion incorporation but not nuclear localization. Furthermore, a
  45.        single mutation (E25K) located on the hydrophilic face of this predicted
  46.        alpha-helical structure affected not only virion incorporation but also
  47.        nuclear localization of Vpr. The differential impairment of Vpr nuclear
  48.        localization and virion incorporation by mutations in the predicted
  49.        N-terminal alpha-helical region suggests that this region of Vpr plays a
  50.        role in both of these biological functions of Vpr.
  51.  DE    Amino Acid Sequence  Base Sequence  Cell Line  Cell Nucleus/*METABOLISM
  52.        Cloning, Molecular  Comparative Study  DNA Primers  Gene Products,
  53.        vpr/BIOSYNTHESIS/*CHEMISTRY/*METABOLISM  *Genes, vpr  Human  HIV Long
  54.        Terminal Repeat  HIV-1/*GENETICS/*PHYSIOLOGY  Kinetics
  55.        Methionine/METABOLISM  Molecular Sequence Data  Mutagenesis,
  56.        Site-Directed  Polymerase Chain Reaction  Protein Conformation  *Protein
  57.        Structure, Secondary  Recombinant
  58.        Proteins/BIOSYNTHESIS/CHEMISTRY/METABOLISM  Support, Non-U.S. Gov't
  59.        Virion/GENETICS/PHYSIOLOGY  Virus Replication  JOURNAL ARTICLE
  60.  
  61.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  62.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  63.  
  64.