home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ Collection of Education / collectionofeducationcarat1997.iso / HEALTH / MED9602.ZIP / M9620855.TXT < prev    next >
Text File  |  1996-02-26  |  3KB  |  44 lines
  1.        Document 0855
  2.  DOCN  M9620855
  3.  TI    RAW264 macrophages stably transfected with an HIV-1 LTR reporter gene
  4.        provide a sensitive bioassay for analysis of signalling pathways in
  5.        macrophages stimulated with lipopolysaccharide, TNF-alpha or taxol.
  6.  DT    9602
  7.  AU    Sweet MJ; Hume DA; Centre for Molecular and Cellular Biology, University
  8.        of; Queensland, Brisbane, Australia.
  9.  SO    J Inflamm. 1995;45(2):126-35. Unique Identifier : AIDSLINE MED/96050094
  10.  AB    Bacterial lipopolysaccharide (LPS) modulates expression of a variety of
  11.        genes in macrophages, and additionally activates viral promoters
  12.        including the HIV-1 LTR. The HIV-1 LTR driving the luciferase reporter
  13.        gene was stably transfected into the murine macrophage cell line,
  14.        RAW264. In stably transfected cells, luciferase activity was
  15.        LPS-dependent. As little as 0.01 ng/ml LPS was sufficient to increase
  16.        luciferase activity over basal levels with maximal stimulation resulting
  17.        in a 10- to 20-fold response. The cells also responded to human and
  18.        murine tumour necrosis factor (TNF alpha). Endogenous TNF alpha was not
  19.        involved in LPS responses, since pretreatment with alpha-TNF alpha
  20.        antibody did not affect activation. Induction of HIV-1 LTR activity by
  21.        LPS occurred independently of phorbol myristate acetate (PMA) sensitive
  22.        protein kinase C (PKC), since depletion of PKC by prolonged exposure to
  23.        PMA blocked TNF alpha and PMA responses but was not able to abolish LPS
  24.        action on these cells. Taxol (5-20 micrograms/ml), a chemotherapeutic
  25.        agent which mimics LPS action on macrophages, was also able to increase
  26.        expression of the reporter gene driven by the HIV-1 LTR. However, lower
  27.        doses of taxol that were not sufficient to trans-activate the LTR or to
  28.        induce TNF alpha expression were cytotoxic to RAW264 cells suggesting
  29.        that the cytotoxic and LPS-like activities of taxol were not linked.
  30.        This cell line provides a convenient method for detecting LPS-like
  31.        activity and is a useful tool for examining LPS and TNF alpha signalling
  32.        pathways.
  33.  DE    Animal  Cell Line  Gene Expression  Genes, Reporter  Human  HIV Long
  34.        Terminal Repeat/*GENETICS  HIV-1/*GENETICS
  35.        Lipopolysaccharides/*PHARMACOLOGY  Luciferase/GENETICS/METABOLISM
  36.        Macrophages/*METABOLISM  Mice  Paclitaxel/*PHARMACOLOGY  Protein Kinase
  37.        C/METABOLISM  Signal Transduction  Tetradecanoylphorbol
  38.        Acetate/PHARMACOLOGY  Transfection  Tumor Necrosis Factor/*PHARMACOLOGY
  39.        JOURNAL ARTICLE
  40.  
  41.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  42.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  43.  
  44.