home *** CD-ROM | disk | FTP | other *** search
/ Collection of Education / collectionofeducationcarat1997.iso / HEALTH / MED9605D.ZIP / M9650951.TXT < prev    next >
Text File  |  1996-03-30  |  3KB  |  44 lines
  1.        Document 0951
  2.  DOCN  M9650951
  3.  TI    Quantitation of human immunodeficiency virus type 1 DNA by two PCR
  4.        procedures coupled with enzyme-linked oligosorbent assay.
  5.  DT    9505
  6.  AU    Mallet F; Hebrard C; Livrozet JM; Lees O; Tron F; Touraine JL; Mandrand
  7.        B; Unite Mixte de Recherche 103 Centre National de la Recherche;
  8.        Scientifique-bioMerieux, Ecole Normale Superieure de Lyon,; France.
  9.  SO    J Clin Microbiol. 1995 Dec;33(12):3201-8. Unique Identifier : AIDSLINE
  10.        MED/96156129
  11.  AB    Two quantitative PCR methods with our nonisotopic enzyme-linked
  12.        oligosorbent assay (ELOSA) in microtiter plate format were developed for
  13.        quantitation of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1).
  14.        Quantitative competitive PCR (QC-PCR) was based on the coamplification
  15.        of the wild-type nef region with a mimic competitive nef gene template
  16.        carrying mutations in the capture region. Correlation of wild-type HIV-1
  17.        nef DNA to mimic template copy number permitted quantitation of HIV-1
  18.        copy numbers in the range of 20 to 2,000 copies per micrograms of DNA.
  19.        Internally controlled PCR (IC-PCR) was based on coamplification of the
  20.        nef region and the ras gene as an internal endogenous standard.
  21.        Correlation to known amounts of HIV-1 DNA permitted quantitation by
  22.        IC-PCR of HIV-1 copy numbers in the range of 10 to 2,000 copies per
  23.        microgram of DNA. QC- and IC-PCR-ELOSA were performed on a panel of 53
  24.        seropositive patients and 12 seronegative controls. The methods showed
  25.        similar coefficients of variation below 24%. Quantitations by QC- and
  26.        IC-PCR-ELOSA were identical for 77% of patient samples. The copy level
  27.        ranged between 443 +/- 156 and 21,453 +/- 13,511 copies per 10(5) CD4
  28.        cells for asymptomatic and AIDS patients, respectively. The simplicity
  29.        and reliability of QC- and IC-PCR-ELOSA methods make them appropriate
  30.        for routine laboratory use in the quantitation of viral and bacterial
  31.        DNAs.
  32.  DE    Acquired Immunodeficiency Syndrome/VIROLOGY  Base Sequence  Comparative
  33.        Study  DNA Primers/GENETICS  DNA, Viral/*ANALYSIS/*GENETICS
  34.        Enzyme-Linked Immunosorbent Assay/*METHODS/STATISTICS & NUMER
  35.        DATA/STANDARDS  Evaluation Studies  Genes, nef  Human  HIV
  36.        Infections/VIROLOGY  HIV-1/*GENETICS/*ISOLATION & PURIF  Indicators and
  37.        Reagents  Molecular Sequence Data  Polymerase Chain
  38.        Reaction/*METHODS/STATISTICS & NUMER DATA  Quality Control
  39.        Reproducibility of Results  JOURNAL ARTICLE
  40.  
  41.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  42.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  43.  
  44.